TRAP染色

       TRAP染色：TRAP 染色是用于检测骨组织、骨细胞中特征物质的染色，使破骨细胞呈红色，背景呈绿色或蓝色。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)为破骨细朐的标志酶，特异地分布于破骨细胞中，为破骨细胞所特有，通常作为鉴别破骨细胞的重要标志物。在含酒石酸的酸性条件下，TRAP 能将萘酚 AS-BI磷酸盐水解，产生的萘酚 AS-BI 立即与 fast red 或六偶氮副品红结合，在酶活性部位形成不溶性的红色染料，通过观察红色染料的形成可间接了解酸性磷酸酶的活性，进一步鉴别及分析破骨细胞的状态。

      实验步骤：

（1）脱蜡至水：二甲苯Ⅰ5分钟，二甲苯Ⅱ5分钟，二甲苯Ⅲ5分钟，无水乙醇1分钟，95%乙醇1分钟，75%乙醇1分钟，自来水冲洗数秒。

（2）将切片用组化笔画圈后放在（加有一定量的放置切片蒸干的纯水）湿盒中，用纯水37°C孵育2h。

（3）切片孵育完成后倾去纯水，滴加过滤好的TRAP工作液覆盖组织，置于37°C避光反应20~30分钟。

（4）倾去孵育液并水洗，苏木素复染10s。

（5）脱水透明：75%乙醇1分钟，95%乙醇1分钟，无水乙醇1分钟，二甲苯3次，每次1-2分钟，中性树胶封固。

      染色结果：破骨细胞呈红色，背景呈绿色或蓝色。