特殊染色

Von Kossa染色

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Von Kossa染色原理:

       钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等方面也起重要作用。许多染料可以与钙形成螯合物,包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。钙盐染色常用方法有Von Kossa溶液和茜素红S法,本产品原理在于该法是一种金属置换法,Von Kossa银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。

实验步骤:
(1)脱蜡至水:二甲苯Ⅰ5分钟,二甲苯Ⅱ5分钟,二甲苯Ⅲ5分钟,无水乙醇1分钟,95%乙醇1分钟,75%乙醇1分钟,蒸馏水洗1分钟。
(2)切片入Von Kossa银溶液强光照射15-60min。蒸馏水洗1min。
(3)入海波溶液处理2min。
(4)(可选)HE染色液或Van Gieson复染细胞。
(5)95%乙醇、无水乙醇脱水,二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明、中性树胶封固。
阴性对照(可选):
      取另外一张连续切片脱蜡至水,置于Von Kossa对照液处理20min,流水冲洗5min,与实验片一同入Von Kossa银溶液,其余步骤同上。

染色结果:

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