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Luxol Fast Blue髓鞘染色原理:
髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜,即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成,是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结,可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义,髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期,在早期着色较深;病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴,可用脂质染色加以显示,后期彻底溃变并被吞噬细胞清除,故不再有髓鞘的阳性结果。
很多疾病都可以引起髓鞘的变化,Luxol Fast Blue髓鞘染色可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况,对神经组织的病理诊断和研究均有意义,例如神经纤维受损时,髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。
实验步骤:
(1)脱蜡至水:二甲苯Ⅰ5分钟,二甲苯Ⅱ5分钟,二甲苯Ⅲ5分钟,无水乙醇1分钟,95%乙醇1分钟,75%乙醇1分钟,蒸馏水洗1分钟。
(2)入 Luxol Fast Blue染色液室温染色12~20h,95%乙醇洗去多余染色液。
(3)蒸馏水冲洗,入Luxol分化液分色10~15s。
(4)入70%乙醇分色30s至灰白质清晰,蒸馏水冲洗(如果分色不足,可重复3步骤)。
(5)入伊红染色液复染1~5min,水洗。
(6)95%乙醇、无水乙醇脱水,二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明、中性树胶封固。
染色结果:
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